7月12日,西北農(nóng)林科技大學(xué)聯(lián)合華南師范大學(xué)、美國蒙大拿州立大學(xué)在《Plant Biotechnology Journal》發(fā)表了題為“Creating ultra-high linolenic acid camelina by co-expressing AtFAD2sm with synonymous mutations and BnFAD3 in the fae1 mutant”的研究論文,成功開發(fā)出α-亞麻酸(ALA, 18:3)含量最高達(dá)69.5%的亞麻薺(Camelina sativa)新種質(zhì),創(chuàng)下油料作物ω-3脂肪酸含量的新紀(jì)錄!該成果為解決人類膳食中ω-3/ω-6脂肪酸嚴(yán)重失衡問題提供了創(chuàng)新性方案。該研究第一作者為農(nóng)學(xué)院博士生李娜,通訊作者為張猛教授。
α-亞麻酸是人體必需的歐米伽3多不飽和脂肪酸,對預(yù)防心血管疾病、炎癥和癌癥至關(guān)重要?,F(xiàn)代植物油工業(yè)為延長保質(zhì)期,普遍培育高油酸/低亞麻酸品種,導(dǎo)致膳食中ω-6/ω-3比例嚴(yán)重失調(diào)(典型飲食比例達(dá)15:1,遠(yuǎn)高于理想值1-4:1)。油料作物種子中亞麻酸合成需要Δ12-去飽和酶(FAD2)和Δ15-去飽和酶(FAD3)相繼催化形成,然而,自該兩種基因功能鑒定30余年來,其在亞麻酸改良上遇到了諸多障礙。其中最主要的問題是FAD2的轉(zhuǎn)基因共抑制問題(Du等,2019)。為改善油料作物亞麻酸含量,該團(tuán)隊(duì)提出三重創(chuàng)新策略:1)雙酶協(xié)同表達(dá):引入經(jīng)同義突變優(yōu)化的擬南芥Δ12-去飽和酶基因AtFAD2sm(克服轉(zhuǎn)基因沉默),疊加甘藍(lán)型油菜Δ15-去飽和酶基因BnFAD3;2)時(shí)空精準(zhǔn)調(diào)控:采用種子特異性啟動(dòng)子(Phaseolin)確保酶在種子發(fā)育期高效表達(dá);3)阻斷競爭通路:利用基因編輯敲除脂肪酸延長酶基因FAE1,阻止油酸(18:1)向超長鏈脂肪酸轉(zhuǎn)化,使代謝流定向涌向ALA合成(前期研究證實(shí)此突變不影響作物生長)。
該研究在全基因同義突變(FAD2sm)可以有效克服FAD2轉(zhuǎn)基因共抑制的研究基礎(chǔ)上,在擬南芥野生型上聯(lián)合表達(dá)BnFAD3。在確定可行性后,進(jìn)而在野生型亞麻薺中聯(lián)合表達(dá),將亞麻酸含量從30%提高到50%。進(jìn)而在擬南芥fae1突變體中阻斷脂肪酸延遲通路后,聯(lián)合表達(dá)FAD2sm和BnFAD3,可以將亞麻酸含量從20%提高到50%。最后,在基因編輯的亞麻薺fae1突變體中,共表達(dá)AtFAD2sm+BnFAD3實(shí)現(xiàn)亞麻酸含量68.3%(OE 5-1株系),較野生型(31.1%)提升120%,較單過表達(dá)FAD3的對照(50%)提升39.4%。更為重要的是,亞麻酸含量穩(wěn)定遺傳至T4代,含量保持在65.1–69.5%,并且超高亞麻酸的積累沒有影響種子含油量、千粒重和發(fā)芽率等農(nóng)藝性狀,該材料可以直接應(yīng)用于生產(chǎn),并且可以將該方案應(yīng)用于其油料作物亞麻酸的改良。該成果顯著優(yōu)于此前報(bào)道的亞麻薺ALA紀(jì)錄(50%,Park et al. 2023)及油菜最高值(53%,Liu et al. 2024)。
這項(xiàng)研究完美詮釋了代謝工程‘開源節(jié)流’策略——通過阻斷競爭途徑釋放碳流,再以智能基因設(shè)計(jì)強(qiáng)化目標(biāo)通路,為油料作物精準(zhǔn)育種樹立新標(biāo)桿。該研究得到國家自然科學(xué)基金(32171837和32400256)的資助。
原文鏈接:https://doi.org/10.1111/pbi.70260
